疑难解析 | 2023年度直播答疑热点汇总

细胞培养过程中，我们通常会遇到各种各样的问题，这些问题一般是多种因素造成的，如细胞密度、培养环境、操作方法等。2023年，普诺赛围绕细胞培养问题，共举办了10场线上直播，吸引了万余人观看。直播期间，大家踊跃发言，提出了日常实验中遇到的问题。本期直播答疑筛选出部分问题做了详细解答。牙源性干细胞培养时，血清会诱导分化吗？血清成份复杂，里面包含抑制分化的因子，也包含促进分化的因子；间充质干细胞一类成体干细胞大多可以用血清培养，单能干细胞，用血清不会分化；胚胎干会细胞分化。血清的刺激...

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直播答疑 | 细胞培养答疑专场

12月14日的直播中，普诺赛直播间为大家介绍了细胞黑点、细胞状态变形、细胞空泡、聚团、脱落等常见问题，直播回放请至B站-“普诺赛生物”进行观看。本期直播答疑，从直播间提问中，筛选出部分有代表性的问题，做了详细解答。如有其他问题，也欢迎大家在公众号留言，我们将在线解答。消化时间过长会损伤细胞吗？消化时间过长会导致细胞膜蛋白的改变，最直观的表现就是消化后第二天漂浮细胞很多或者贴壁慢。胰酶消化不掉的，二次消化对细胞损伤小还是机械吹打对细胞损伤小？建议二次消化。细胞与细胞间的连接没有...

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细胞学堂 | A-498细胞知识盘点

A-498（人肾癌细胞）细胞由Aaronson·S建立，是从一名52岁女性肾癌患者的肾组织中分离出的具有上皮形态的细胞系。该细胞系是一种合适的转染宿主，在肿瘤研究中具有一定的应用价值，常作为肾细胞癌研究的模型。本期细胞学堂为大家整理了A-498细胞的培养条件与传代、冻存步骤及常见应用，帮助您快速上手开展实验。细胞形态A498细胞贴壁生长，呈上皮样形态，细胞铺开面积大，单位面积细胞总数量少，少量细胞有触角；低密度时可观察到单个细胞清晰的边缘，密度大于100%时边缘不清晰，细胞与...

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细胞学堂 | 实验室细胞计数指南

细胞计数是实验室中常见的一项操作，用于确定样品中细胞的数量，判断细胞数量是否满足实验需求。本期细胞学堂为大家整理了几种常见的计数方法：人工手动计数法、自动细胞计数仪法，以及悬浮细胞和贴壁细胞在不同密度下的镜下视野的参考范围，帮助您快速上手开展实验。1人工手动计数法即通过肉眼观察显微镜视野中的细胞数量，从而进行统计。操作步骤1将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上；2轻轻吹打细胞悬液，使细胞均匀分布；吸出10μL-20μL左右的细胞悬液滴在盖片边缘，使细胞悬液充满盖玻...

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直播答疑 | 悬浮细胞培养要点解析

11月16日，普诺赛直播间为大家介绍了悬浮细胞的生长特点、培养注意事项，并通过THP-1、NK-92、NCI-H209三个细胞案例，深入讲解了悬浮细胞的培养要点。直播回放可移步至B站-“普诺赛生物”进行观看。本期直播答疑，从直播间提问中，筛选出部分有代表性的问题，做了详细解答。如有其他问题，也欢迎大家在推文底部留言，我们将在线解答。Q1传代时，细胞密度比较低，但是培养基又变黄了，怎么办？细胞培养过程中，如发现细胞量较少，但培养基变黄较快，可以从以下3个方面进行排查：▶检查培养...

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细胞学堂 | 培养B16系列细胞必看知识点

B16系列细胞属于小鼠黑色素瘤细胞系，是源自C57小鼠的一种皮肤癌细胞，常用于肿瘤生物学研究。本期细胞学堂为大家整理了B16系列细胞的培养方法与注意事项，B16细胞黑色素的形成原因及解决方法，帮助您快速上手开展实验。01B16系列细胞培养方法培养条件RPMI-1640(PM150110)＋10%FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120)；生长特性贴壁生长，生长迅速，能产生黑色素；传代方式0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化2-3min，推荐传代比例1:3-1:...

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培养基成分的称取、分装及保存！

培养基成分的称取：培养基的各种成分必须**称取并要注意防止错乱，*好一次完成，不要中断。可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方面军做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。称取完毕后，还应进行一次检查。培养基的分装：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时*好能使用半自动或电动的定量分装器。分...

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细胞学堂 | 手把手教你培养SV-HUC-1

SV-HUC-1(人输尿管上皮永生化细胞)，是由猿猴空泡病毒40转染至1名11岁男孩的泌尿道上皮细胞，而建立起来的永生化细胞系。其分化特性与正常细胞相似，培养简单，可无限传代，却不属于肿瘤细胞[1]。基础信息❖生长培养基：Ham'sF-12K＋10%FBS＋1%P/S❖生长特性：贴壁，上皮细胞样❖推荐传代比例：1:2-1:4❖推荐换液频率：2~3次/周❖培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃❖冻存条件：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSOSV-HUC-...

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