普诺赛4月直播答疑：常见细胞污染类型及解决方法

在4月28日开播的“常见细胞污染类型及解决方法”课程中，有很多老师就细胞污染提出了疑问。我们筛选出部分代表性问题，并作了详细解答。01Q：在细胞培养液中，有种可以游动的虫子是什么污染？A：是细菌污染。带鞭毛的细菌就是会游动的。02Q：有很多黑点，在原位颤抖，没那么明显的定向运动，是什么污染？A：细胞碎片、血清沉淀和有些细菌污染，都会在原位颤抖。前者是原地做不规律的布朗运动，细菌是原地转动，频率会高很多。03Q：血清的絮状物杂质属于正常现象吗？A：血清里面有一些大分子蛋白和一些...

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SH-SY5Y收货常见问题及解决方案

常温运输过程中，细胞不免受到震荡和温度变化的影响，出现皱缩、聚团甚至脱落的现象。遇到这种情况，不用紧张，只要正确处理，细胞就能恢复正常生长。收货时皱缩常温细胞收货后，把细胞放进细胞培养箱静置2-4小时即可。如果4小时后细胞仍然没有铺展开，密度适中的前提下可以静置过夜（过夜前倒出部分培养基，留5-10mL在瓶中，瓶盖拧松）。收货时聚团常温细胞收货后，先把细胞放进细胞培养箱静置2-4小时以稳定状态，再进行传代。传代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。收货时脱落常...

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细胞培养中常见细胞污染类型及预防办法

凡混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染，细胞污染不能*被消除，但能减少其发生的频率和后果的严重性。本文将简要介绍几种常见的细胞污染类型及处理方法。常见污染类型细菌污染特征：大小在0.5~5μm，比动物细胞小很多。多呈球状或杆状，形态规则，分布均匀；增殖速度快，一般污染后48~72小时爆发式增殖；营养消耗快，培养基很快变黄，变浑浊；镜下观察有明显的定向运动。处理方法：轻度污染可用10X双抗清洗处理，重度污染建议消杀后丢弃。真菌污染特征：呈链球状...

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大鼠海马神经元细胞培养和传代流程

体外培养大鼠海马神经元细胞细胞周期有限；建议使用与procell配套的专用生长培养基和正确的操作方法进行培养，以保证细胞处于理想培养状态。procell实验室分离的大鼠海马神经元细胞采用胰蛋白酶消化、神经元特异性培养基培养、筛选结合化学试剂抑制制备。细胞总数约为5×105个细胞/瓶。大鼠海马神经元细胞培养和传代流程（请严格按照无菌操作）：1、从原培养瓶中吸出培养基，用PBS缓冲液润湿细胞两次，加入2-3ml025%胰蛋白酶消化细胞（注意消化时间，一般控制在1-2min内）；2...

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收到293 [HEK-293]细胞后如何操作？

293[HEK-293]细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞，293[HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出，293[HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293[HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293[HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主...

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直播答疑 | 普诺赛3月直播：细胞系由来及鉴定问题

在普诺赛3月30日开播的细胞培养直播课堂中，有很多同学提出各种疑问。我们筛选出具有代表性的问题，并作了详细解答。01动物细胞怎么鉴定？要根据实验的目的以及细胞类型进行选择。如果是人源细胞系，并且有文献或数据库公布对应细胞信息，则进行STR鉴定即可；如果使非人源的细胞系，可以进行种属鉴定，并且附加一个研究方向相关的指标进行验证，部分小鼠细胞也可以做STR鉴定，但目前数据库不*，很多都没有匹配数据。对于原代细胞，如果能够确保取材无误，仅进行特异性指标方面的检测就可以了，方法可采用...

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胎牛血清的储存和使用都是有讲究的

胎牛血清是实验室常用的天然培养基，但不能直接使用。无论是存储还是使用，都比较复杂。血清的常规处理是热钝化，即置于56°水浴中30分钟；其目的是使血清中的补体成分和一些未知的细胞生长抑制分子失活。实验表明，大多数细胞不需要经过正确处理后的热灭活血清。经过这样的处理，血清只能轻微促进细胞的生长，或者根本没有作用。即使是高温处理通常也会影响血清的质量并降低细胞的生长速度。热处理过的血清会显着增加沉淀物的形成。在倒置显微镜下观察时，这些沉淀物，如“小黑点”，常常使研究人员误认为血清被...

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鸡卵泡颗粒细胞分离、培养实验步骤

鸡卵泡颗粒细胞分离、培养实验步骤：A.翅下静脉注射2mLEDTA-2Na(W/V，2%)溶液处死母鸡，新洁尔灭消毒液浸泡消毒5min，打开腹腔，剪取整个卵巢，小心剥离卵泡(以8-15g为最佳)，置于装有PBS缓冲液的无菌培养皿中；B.用加有双抗的PBS缓冲液冲去血污，漂洗3次；将漂洗干净的卵泡移入装有预冷PBS缓冲液的平皿中，剥净卵泡外膜、结缔组织及血管网；C.用手术刀在卵泡表面划一道1-2cm长的切口(动作要快)，释放卵黄，用PBS缓冲液将剩余的卵黄液漂洗干净，剩下的卵泡膜...

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