胎牛血清是通过从胎牛血浆中去除纤维蛋白形成的非常复杂的混合物。它含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,其大部分成分是已知的,但有些尚不清楚。这些物质在促进细胞生长或抑制生长方面达到生理平衡。
胎牛血清在细胞培养中通常优于其他类型的血清。由于胎牛从未暴露于外界,抗体含量明显低于新生牛和小牛血清,因此抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低,是理想的细胞生长补充剂。调整在细胞培养中主要起到以下作用:
1、提供维持细胞指数生长的激素、基础培养基中缺乏或少的营养物质以及主要的低分子营养物质。
2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属等激素,并能与它们所结合的物质结合或调节其活性。
3、在某些情况下,结合蛋白可以与有毒金属和热原结合来解毒。
4、是细胞在塑料培养基质上粘附和铺展所需的因子来源。
5、作为pH缓冲剂。
6、提供蛋白酶抑制剂,使细胞传代过程中剩余的胰蛋白酶失活,保护细胞免受损伤。
7、参与细胞冷冻保存。
在细胞培养中,添加到基础培养基中的胎牛血清浓度大多为5%~20%(常见的是10%)。具体到不同的实验,最佳浓度应根据文献报道,或细胞类型或基础培养基的组成来确定。
胎牛血清应在-20℃保存,干冰冷链运输,避免反复冻融,以保证血清中因子的活性不受影响,保证血清的优良品质。将血清从-20℃取出后,融化,按推荐体积加入基础培养基中,充分混合,制成新鲜的*培养基。(整个操作需要在无菌超净台上进行,注意无菌操作。)