RAW 264.7细胞培养基培养都会遇到哪些问题？

　　RAW 264.7细胞培养基培养就是要对它的基础培养条件了如指掌，比如生长特性、细胞形态、所需的培养基，甚至培养环境、传代比例等等，做到知己知彼，才能百战百胜。那么我们在使用过程中都会遇到哪些问题呢？

　　

　　1、收货后，细胞不见了

　　

　　收到细胞，期待值满满地打开包装准备细胞培养，但在显微镜下却找不到细胞！这是因为RAW264.7细胞贴壁较松，快递运输路上受到颠簸，可能会脱落。脱落的细胞悬浮在培养基中不容易聚焦。这时候不用担心，把细胞放进培养箱静置两个小时就可以看到了。如果静置后看到的细胞仍偏少，请将瓶子里的培养基都转移到离心管里，1200rpm（约250g）离心3分钟，即可看到沉淀的细胞。细胞全部脱落，慌乱之下可能会一个细胞都找不着。这个时候离心验证是理想方法。

　　

　　2、收货处理后，细胞不贴壁

　　

　　将细胞离心收集，用新鲜的RAW 264.7细胞培养基重悬细胞放到新的细胞培养瓶里之后，可能会出现细胞成团漂浮、不贴壁的情况。这种情况下，把细胞离心收集，用1mL培养基重悬，慢慢地，轻轻地吹打，直到细胞被吹成单细胞，就可以重新铺板了。RAW264.7脱落后倾向于抱团，抱团时细胞是活着的，但很难贴壁。记得一定要把聚成团的细胞吹散成单细胞，不然细胞很难重新贴壁。

　　

　　正确的传代方法是RAW 264.7细胞培养基的关键，每一步操作都要细致入微，稍有不慎细胞就分化了。RAW264.7细胞不能用胰酶消化，许多实验室用细胞刮传代，这是一种非常经典好用的方法。普诺赛在RAW264.7细胞培养这十几年里，摸索出一个更不错的方法：吹打传代。吹打传代操作简单，对细胞培养的新手们更友好，也能更好地控制细胞分化率。