一
常见的细胞培养基
细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。
基础培养基(MM)
基础细胞培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞保持良好的生长状态。
培养基的种类有很多,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是应用较为广泛的。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。具体的特征及应用如下:
完-全培养基(CM)
完-全培养基是在基础培养基中添加了血清、抗生素等物质,也叫(血清)细胞培养基。其中大部分细胞培养常用的是牛血清,因为牛血清中含有促进细胞增殖的各种生长因子。此外为防止污染,培养液中尚需加一定量的抗生素。
完-全培养基根据添加血清量的多少,可分为细胞生长培养基和细胞维持培养基,用于不同细胞和不同研究。
无血清细胞培养基(SFM)
无血清培养基是指在合成培养基的基础上引入成分完-全明确或部分明确的血清替代成分,主要是由基础培养基和添加物(替代血清的补充因子)组成。其主要成分为下列几种:
黏附因子
约有80%的细胞是属于贴附型生长。一般的细胞培养基是利用血清作为其来源,在无血清培养基中,细胞黏附因子就是很重要的物质。
生长因子
生长因子是维持细胞活性与促进细胞增生、迁移、分化等,不可-或缺的要素。
酶抑制剂
贴附型细胞一般多以胰蛋白酶(trypsin)进行传代。在一般细胞培养中,血清中含有抑制trypsin的成分,所以无血清培养基必须添加trypsin抑制剂。
细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化。
优点
1 | 未知组分少; |
2 | 避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染; |
3 | 杂蛋白含量少,避免血清成分影响研究结果或是产品制程,提高产品表达水平并易于纯化。 |
缺点
1 | 无血清培养基成本较高; |
2 | 不是所有的细胞都能在无血清培养基中培养; |
3 | 细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基保存和应用方面局限性很大。 |
二
细胞培养基的选择
细胞培养基的种类很多,如何选择适宜的培养基是细胞培养的关键。在此提供以下建议可供参考:
1
如果是新购买的细胞,可以向细胞株的厂家咨询,或者询问引种来源查找细胞库上对应的培养基;
2
根据细胞的特点及实验的需要来选择培养基;
3
自己试验,用多种培养基培养细胞,做生长曲线,记录细胞的生长速度,观察细胞的形态变化,根据实验结果选择最佳培养基。
培养基种类和细胞系并不是一个强制的对应关系。具体培养细胞使用什么培养基,主要还是根据数据库、文献和经验哦!