鸡卵泡颗粒细胞分离自PMSG诱导后3天的鸡卵巢组织,颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞,其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。细胞形状呈圆形或椭圆形。细胞采用机械分离法制备而来,细胞总量约为5×105个/瓶,细胞纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。初级卵泡的颗粒细胞为单层;次级卵泡的颗粒细胞增至复层;成熟卵泡的颗粒细胞展开又变为单层。颗粒细胞的胞核大而圆,着色深,细胞的游离面有许多细长突起伸入放射带的凹陷部。
鸡卵泡颗粒细胞分离自鸡卵泡组织;成熟卵泡是卵巢的组织结构成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明显。卵泡内膜细胞紧靠卵泡颗粒层,与颗粒层细胞之间有一层基膜相隔,内膜细胞呈多边形,胞质清亮,胞核圆形,细胞间可见许多毛细血管,外膜细胞位于较外层,多呈梭形,与周围结缔组织分界不明显。卵泡(follicle)中卵母细胞四周有一层菱形或扁平细胞围绕,在卵泡开始发育、卵细胞成长的同时,周围的菱形细胞变为立方形,并由单层增生成复层,因其细胞浆内含有颗粒,故称为颗粒细胞。
鸡卵泡颗粒细胞培养基于4℃条件下可保存3-6个月。在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。